Inflammasome und der Gasdermin D Signalweg

Inflammasome sind Multiproteinkomplexe, die einen Sensor (z.B. NLRP3), einen Adapter (ASC/Pycard) und eine Protease (pro-caspase-1) enthalten.¹ Ein Inflammasom bildet sich als Reaktion auf eine Vielzahl von Pathogen-Associated/- Danger-Associated Molecular Patterns (PAMPs/ DAMPs) oder durch Störungen der zytoplasmatischen Homöostase (engl. "Homeostasis-Altering Molecular Processes" (HAMPs)).² Das Inflammasom aktiviert u.a. Caspase-1, was die Entwicklung von Interleukin-1β und -18 (IL-1β und IL-18) durch proteolytische Spaltung von Pro-IL-1β und Pro-IL-18 fördert. Das 2001 entdeckte, aber erst kürzlich einer Funktion zugeordnete intrazelluläre Protein Gasdermin D wird durch die aktivierte Caspase-1, aber auch durch die im nicht- kanonischen Inflammasom vorkommende Caspase-11 gespalten.^3,4 Die Proteine der Gasdermin-Familie enthalten N-terminale Domänen, die in der Lage sind, Membranporen zu bilden. Die C-terminalen Domänen von Gasderminen wirken dagegen als Inhibitoren der Zytolyse durch intramolekulare Domänenassoziation.

Die Caspase-1 oder Caspase-11-Spaltung von Gasdermin D ist Voraussetzung für die Regulierung der Pyroptose: Bei der Caspase-1/11-Spaltung des Gasdermin N- und C-Domänen-Linkers oligomerisiert das N-terminale Fragment und bildet Poren in der Wirtszellmembran.⁵ Dieser Prozess führt zu einem Zelltod namens Pyroptose und einer weiteren Aktivierung von Inflammasomen durch den Ausstrom von K⁺-Ionen.⁶Aus Gasdermin D gebildete Poren regulieren die nicht-konventionelle Sekretion von Zytokinen wie IL-1β als Reaktion auf zytosolische LPS und anderen Aktivatoren des Inflammasoms.⁷ Das Ausstoßen von Neutrophil Extracellular Traps (NETs) und der damit einhergehende Zelltod (NETose) sind abhängig von Gasdermin D-Spaltung durch Caspase-11. NETose ist eine besondere neutrophile Abwehr von Krankheitserregern.⁸ Gasdermin D-ausgelöste Pyroptose wird durch Lipidperoxidation⁹ reguliert und scheint ein Schlüsseleffektor bei der LPS-induzierten tödlichen Sepsis zu sein.¹⁰

Caspase-8, ein vorgeschalteter Aktivator von Caspase-3, kontrolliert den apoptotischen Zelltod und verhindert die RIPK3-MLKL-abhängige Nekroptose. Caspase-8, aktiviert durch das Yersinia-Effektorprotein YopJ, löst auch die Gasdermin D-Verarbeitung und den Zelltod bei verschiedenen Yersinia-Arten aus.¹¹

Obwohl die Porenbildung durch das N-terminale Fragment von Gasdermin D aufgeklärt wurde, bleibt die Rolle des C-terminalen Fragments von Gasdermin D weiterhin unklar. Mit dem Gasdermin D (mouse) ELISA-Kit, lässt sich der C-terminale Teil von Gasdermin D (sowie das vollständige Protein) detektieren. Wird im Überstand von pyroptotisch sterbenden Zellen ein Signal detektiert, so deutet dies auf das Vorhandensein eines Transporters/einer Pore hin. Gasdermin D könnte entweder zufällig oder für eine bestimmte, noch nicht eindeutige Aufgabe, aus den Zellen transportiert worden sein.

Gasdermin D (mouse) ELISA Kit

Das Gasdermin D (mouse) ELISA Kit detektiert murines full-length Gasdermin D sowie die gespaltene Variante (C-Terminus) in Zellkultur-Überständen und Zellextrakten. Es weist keine Kreuzreaktion mit humanem Gasdermin D auf.